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Masson染色试剂盒的使用步骤有哪些?

更新时间:2023-11-20 点击次数:619次
Masson染色试剂盒是用于组织切片染色的一种常用试剂盒,用于显示胶原蛋白、肌纤维和纤维蛋白等成分。下面是 Masson染色试剂盒的使用步骤:
  1、制备组织切片:首先需要获取待染色的组织样本,并将其固定、包埋和切片。确保切片厚度适当,通常为4-5微米。
  2、石蜡去脱水:将切片从石蜡中除脱水,可以使用xylene或其他去脂剂进行数次的浸泡。每次浸泡时间一般为3-5分钟。
  3、重脱水:将切片依次置入不同浓度的乙醇溶液中,进行数次的重脱水。通常使用95%和100%乙醇,每次浸泡时间为2-3分钟。
  4、染色剥离:在实验室通风橱中取出切片,放入染色剥离液中浸泡。染色剥离液的配制方法可参考试剂盒说明书。一般浸泡时间为10-15分钟。
  5、洗涤:将切片洗涤数次,以去除染色剥离液的残留。使用蒸馏水或缓冲溶液进行洗涤,每次洗涤时间约为1-2分钟。

Masson染色试剂盒

  6.酸性红染色:将切片置于酸性红(pH2.5-3.0)中浸泡,一般浸泡时间为5-10分钟,可以根据需要调整。酸性红是用来染色胶原蛋白。
  7、洗涤:将切片放入蒸馏水或缓冲溶液中洗涤数次,以去除多余的染料。
  8、感光溶解:将切片置于感光溶解液中浸泡,一般浸泡时间为5-10秒钟。感光溶解液有助于去除背景染色。
  9、蓝绿染色:将切片转移到蓝绿染色液中浸泡,时间通常为2-5分钟。蓝绿染色用于染色肌纤维和纤维蛋白。
  10、洗涤:将切片放入蒸馏水或缓冲溶液中洗涤数次,以去除多余的染料。
  11、去水:将切片依次置入不同浓度的乙醇溶液中,进行数次的去水处理。通常使用70%、95%和100%乙醇,每次浸泡时间为2-3分钟。
  12、清洁剂洗涤:用清洁剂(例如xylene)进行数次洗涤,以去除残留的乙醇和其他杂质。每次洗涤时间为2-3分钟。
  13、封片:最后将切片用透明胶片封装,并使用合适的封片剂固定。




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